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Procédé de régénération d'une électrode de travail d'un dispositif électrochimique fonctionnant en mode électrolyseur comportant une électrode de travail (bio-anode) recouverte d'un biofilm, une cathode et éventuellement une électrode de référence, une différence de potentiel (ddp) nominale positive étant appliquée, en fonctionnement nominal, soit entre la bio-anode et la cathode, soit entre la bio-anode et l'électrode de référence, caractérisé en ce qu'il comprend soit une diminution de la ddp d'au moins 10 % de ddp appliquée entre la bio-anode à régénérer et la cathode, en l'absence d'électrode de référence, soit une diminution du potentiel de travail imposé à l'électrode de travail (la bio-anode) à régénérer par rapport à l'électrode de référence d'au moins 0,05 V/ESH, permettant de restaurer le fonctionnement nominal de l'électrolyseur. La régénération peut être poursuivie par la production de H2 à la surface de la bionode en changeant sa polarité par insertion d'une contre-électrode dans le compartiment anodique de la bio-anode.